Visualizações: 18 Autor: Editor de sites Publicar Tempo: 2024-05-16 Origem: Site
As proteínas são as substâncias fundamentais das atividades da vida, e sua diversidade de estrutura e função determina sua importância na biomedicina, pesquisa em biologia molecular e produção industrial. A separação e purificação das proteínas são etapas cruciais no campo da biotecnologia e sulfato de amônio, como um precipitante de proteína comumente usado, desempenha um papel importante no processo de purificação de proteínas.
A purificação de proteínas é um pré -requisito para garantir a precisão da pesquisa e aplicação de proteínas. As proteínas purificadas podem ser usadas para:
Análise estrutural, como cristalografia de raios-X, ressonância magnética nuclear (RMN), etc.
Pesquisa funcional, como cinética enzimática, características de ligação, etc.
Desenvolvimento de medicamentos: como alvo de drogas ou drogas.
Aplicações industriais: como catalisadores, aditivos alimentares, etc.
O sulfato de amônio (NH4) 2SO4) é um sal inorgânico econômico, e sua aplicação na purificação de proteínas baseia-se principalmente em sua capacidade de induzir a precipitação de proteínas.
O sulfato de amônio aumenta a força do íon da solução, reduz a força repulsiva entre moléculas de proteína e promove a agregação e a precipitação de moléculas de proteína. Este método é chamado 'precipitação de sal '.
A solubilidade de diferentes proteínas varia em diferentes concentrações de sulfato de amônio, o que permite a precipitação seletiva das proteínas alvo aumentando gradualmente a concentração de sulfato de amônio.
O sulfato de amônio é considerado uma substância inerte que é menos propensa a reações não específicas com proteínas, ajudando a proteger a estrutura natural e a função das proteínas.
Em primeiro lugar, é necessário quebrar as células e liberar proteínas intracelulares através de métodos físicos ou químicos.
Adicione o sulfato de amônio a uma certa concentração para precipitar a maior parte da proteína e remover as impurezas.
Aumentar gradualmente a concentração de sulfato de amônio e precipitar a proteína alvo.
Ressuspense a proteína precipitada em tampão e lave para remover impurezas residuais.
Se necessário, a proteína também pode precisar ser purificada por cromatografia em troca iônica, cromatografia em filtração em gel ou cromatografia de afinidade.
Eficácia de custo: O sulfato de amônio é barato e adequado para aplicações em larga escala.
Fácil de operar: o processo de sedimentação é simples e não requer equipamentos complexos.
Atividade protetora: tem impacto mínimo na estrutura e função natural das proteínas.
Resolução limitada: é difícil distinguir proteínas com propriedades semelhantes.
Possíveis impurezas: o próprio sulfato de amônio pode introduzir impurezas, que precisam ser removidas nas etapas subsequentes.
Com o aprofundamento da pesquisa de proteínas, os requisitos para a tecnologia de purificação de proteínas também estão constantemente aumentando. A purificação do sulfato de amônio no futuro pode ser combinada com tecnologias mais modernas, como:
Tecnologia de cromatografia de alta resolução: melhora a resolução de purificação e distingue mais proteínas.
Automação e miniaturização: melhorando a eficiência e a precisão operacional.
Química verde: redução do consumo químico e poluição ambiental.
O sulfato de amônio, como precipitante tradicional de proteínas, desempenha um papel insubstituível no campo da purificação de proteínas. Sua relação custo-benefício, fácil operação e proteção da atividade proteica o tornaram amplamente utilizados nos processos de purificação de proteínas. Com o desenvolvimento da ciência e da tecnologia, a tecnologia de purificação de sulfato de amônio deve ser combinada com a tecnologia moderna para melhorar ainda mais a eficácia e a eficiência da purificação de proteínas, fornecendo apoio mais forte à pesquisa e aplicação de proteínas.
