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Vues: 14 Auteur: Éditeur de site Temps de publication: 2024-05-16 Origine: Site
Les protéines sont les substances fondamentales des activités de la vie, et leur diversité dans la structure et la fonction détermine leur importance dans la biomédecine, la recherche en biologie moléculaire et la production industrielle. La séparation et la purification des protéines sont des étapes cruciales dans le domaine de la biotechnologie, et le sulfate d'ammonium, en tant que précipitant protéique couramment utilisé, joue un rôle important dans le processus de purification des protéines.
La purification des protéines est une condition préalable pour assurer la précision de la recherche et de l'application des protéines. Les protéines purifiées peuvent être utilisées pour:
Analyse structurelle, telle que la cristallographie aux rayons X, la résonance magnétique nucléaire (RMN), etc.
Recherche fonctionnelle, telle que la cinétique enzymatique, les caractéristiques de liaison, etc.
Développement de médicaments: en tant que cible de médicament ou médicament lui-même.
Applications industrielles: telles que les catalyseurs, les additifs alimentaires, etc.
Le sulfate d'ammonium (NH4) 2SO4) est un sel inorganique rentable, et son application dans la purification des protéines est principalement basée sur sa capacité à induire des précipitations de protéines.
Le sulfate d'ammonium augmente la résistance à l'ion de la solution, réduit la force répulsive entre les molécules de protéines et favorise l'agrégation et la précipitation des molécules de protéines. Cette méthode est appelée 'Salt Precipitation '.
La solubilité de différentes protéines varie à différentes concentrations de sulfate d'ammonium, ce qui permet une précipitation sélective des protéines cibles en augmentant progressivement la concentration de sulfate d'ammonium.
Le sulfate d'ammonium est considéré comme une substance inerte qui est moins sujette aux réactions non spécifiques avec les protéines, aidant à protéger la structure et la fonction naturelles des protéines.
Premièrement, il est nécessaire de décomposer les cellules et de libérer des protéines intracellulaires par des méthodes physiques ou chimiques.
Ajouter le sulfate d'ammonium à une certaine concentration pour précipiter la plupart des protéines et éliminer les impuretés.
Augmentez progressivement la concentration de sulfate d'ammonium et précipitez la protéine cible.
Respirez la protéine précipitée dans le tampon et le lavage pour éliminer les impuretés résiduelles.
Si nécessaire, la protéine peut également avoir besoin d'être purifiée par chromatographie d'échange d'ions, chromatographie sur filtration du gel ou chromatographie d'affinité.
Cossibilité: le sulfate d'ammonium est peu coûteux et adapté aux applications à grande échelle.
Facile à utiliser: le processus de sédimentation est simple et ne nécessite pas d'équipement complexe.
Activité protectrice: a un impact minimal sur la structure naturelle et la fonction des protéines.
Résolution limitée: il est difficile de distinguer les protéines avec des propriétés similaires.
Impuretés possibles: le sulfate d'ammonium lui-même peut introduire des impuretés, qui doivent être supprimées dans les étapes suivantes.
Avec l'approfondissement de la recherche sur les protéines, les exigences de technologie de purification des protéines augmentent également en constante augmentation. La purification du sulfate d'ammonium à l'avenir peut être combinée avec des technologies plus modernes, telles que:
Chromatographie à haute résolution: améliore la résolution de purification et distingue plus de protéines.
Automatisation et miniaturisation: amélioration de l'efficacité opérationnelle et de la précision.
Chimie verte: réduction de la consommation chimique et pollution environnementale.
Le sulfate d'ammonium, en tant que précipitant protéique traditionnel, joue un rôle irremplaçable dans le domaine de la purification des protéines. Sa rentabilité, son fonctionnement facile et sa protection de l'activité des protéines l'ont rendu largement utilisé dans les processus de purification des protéines. Avec le développement de la science et de la technologie, la technologie de purification du sulfate d'ammonium devrait être combinée avec la technologie moderne pour améliorer encore l'efficacité et l'efficacité de la purification des protéines, fournissant un soutien plus fort pour la recherche et l'application des protéines.
