බැලීම්: 19 කර්තෘ: අඩවි සංස්කාරක ප්රකාශන වේලාව: 2024-05-16 මූලාරම්භය: අඩවිය
ප්රෝටීන යනු ජීව ක්රියාකාරකම්වල මූලික ද්රව්ය වන අතර ඒවායේ ව්යුහයේ සහ ක්රියාකාරීත්වයේ විවිධත්වය ජෛව වෛද්ය විද්යාව, අණුක ජීව විද්යා පර්යේෂණ සහ කාර්මික නිෂ්පාදනයේ වැදගත්කම තීරණය කරයි. ප්රෝටීන වෙන් කිරීම සහ පිරිසිදු කිරීම ජෛව තාක්ෂණ ක්ෂේත්රයේ තීරණාත්මක පියවර වන අතර ඇමෝනියම් සල්ෆේට් බහුලව භාවිතා වන ප්රෝටීන් අවක්ෂේපණයක් ලෙස ප්රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේ ක්රියාවලියේ වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි.
ප්රෝටීන් පිරිපහදු කිරීම ප්රෝටීන පර්යේෂණයේ සහ යෙදුමේ නිරවද්යතාවය සහතික කිරීම සඳහා පූර්ව අවශ්යතාවයකි. පිරිසිදු කරන ලද ප්රෝටීන් භාවිතා කළ හැකිය:
X-ray ස්ඵටික විද්යාව, න්යෂ්ටික චුම්භක අනුනාදනය (NMR) වැනි ව්යුහාත්මක විශ්ලේෂණය.
එන්සයිම චාලක විද්යාව, බන්ධන ලක්ෂණ ආදිය වැනි ක්රියාකාරී පර්යේෂණ.
ඖෂධ සංවර්ධනය: ඖෂධ ඉලක්කයක් හෝ ඖෂධයක් ලෙස.
කාර්මික යෙදුම්: උත්ප්රේරක, ආහාර ආකලන ආදිය.
ඇමෝනියම් සල්ෆේට් (NH4) 2SO4) යනු ලාභදායී අකාබනික ලුණු වන අතර ප්රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේදී එහි යෙදීම ප්රධාන වශයෙන් ප්රෝටීන් වර්ෂාපතනය ඇති කිරීමට ඇති හැකියාව මත පදනම් වේ.
ඇමෝනියම් සල්ෆේට් ද්රාවණයේ අයන ශක්තිය වැඩි කරයි, ප්රෝටීන් අණු අතර විකර්ෂක බලය අඩු කරයි, ප්රෝටීන් අණු එකතු කිරීම සහ වර්ෂාපතනය ප්රවර්ධනය කරයි. මෙම ක්රමය 'ලුණු වර්ෂාපතනය' ලෙස හැඳින්වේ.
විවිධ ප්රෝටීන වල ද්රාව්යතාව ඇමෝනියම් සල්ෆේට් විවිධ සාන්ද්රණයන්හි වෙනස් වන අතර එමඟින් ඇමෝනියම් සල්ෆේට් සාන්ද්රණය ක්රමයෙන් වැඩි කිරීමෙන් ඉලක්කගත ප්රෝටීන වල වරණ වර්ෂාපතනයට ඉඩ සලසයි.
ඇමෝනියම් සල්ෆේට් නිෂ්ක්රීය ද්රව්යයක් ලෙස සලකනු ලබන අතර එය ප්රෝටීන සමඟ නිශ්චිත නොවන ප්රතික්රියා වලට අඩු අවදානමක් ඇති අතර ප්රෝටීන වල ස්වාභාවික ව්යුහය සහ ක්රියාකාරිත්වය ආරක්ෂා කිරීමට උපකාරී වේ.
පළමුව, භෞතික හෝ රසායනික ක්රම මගින් සෛල බිඳ දැමීම හා අන්තර් සෛල ප්රෝටීන් නිදහස් කිරීම අවශ්ය වේ.
ඇමෝනියම් සල්ෆේට් නිශ්චිත සාන්ද්රණයකට එකතු කර ප්රෝටීන් වැඩි ප්රමාණයක් අවක්ෂේප කිරීමට සහ අපද්රව්ය ඉවත් කරන්න.
ඇමෝනියම් සල්ෆේට් සාන්ද්රණය ක්රමයෙන් වැඩි කර ඉලක්කගත ප්රෝටීන් අවක්ෂේප කරන්න.
අවක්ෂේපිත ප්රෝටීන් බෆරයේ නැවත සවි කර අවශේෂ අපද්රව්ය ඉවත් කිරීමට සෝදන්න.
අවශ්ය නම්, ප්රෝටීන් අයන හුවමාරු වර්ණදේහ, ජෙල් පෙරීමේ වර්ණදේහ හෝ අනුබද්ධ වර්ණදේහ මගින් තවදුරටත් පිරිසිදු කිරීමට අවශ්ය විය හැකිය.
පිරිවැය ඵලදායීතාවය: ඇමෝනියම් සල්ෆේට් මිල අඩු වන අතර මහා පරිමාණ යෙදුම් සඳහා සුදුසු වේ.
ක්රියාත්මක කිරීමට පහසුය: අවසාදිත ක්රියාවලිය සරල වන අතර සංකීර්ණ උපකරණ අවශ්ය නොවේ.
ආරක්ෂිත ක්රියාකාරකම්: ප්රෝටීන වල ස්වාභාවික ව්යුහයට සහ ක්රියාකාරිත්වයට අවම බලපෑමක් ඇත.
සීමිත විභේදනය: සමාන ගුණ ඇති ප්රෝටීන් වෙන්කර හඳුනා ගැනීම අපහසුය.
විය හැකි අපද්රව්ය: ඇමෝනියම් සල්ෆේට් විසින්ම අපද්රව්ය හඳුන්වා දිය හැකි අතර, ඒවා පසුව පියවරේදී ඉවත් කළ යුතුය.
ප්රෝටීන් පර්යේෂණ ගැඹුරු වීමත් සමඟ ප්රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේ තාක්ෂණය සඳහා අවශ්යතා ද නිරන්තරයෙන් වැඩි වේ. අනාගතයේදී ඇමෝනියම් සල්ෆේට් පිරිසිදු කිරීම වඩාත් නවීන තාක්ෂණයන් සමඟ ඒකාබද්ධ කළ හැකිය, එනම්:
අධි විභේදන වර්ණදේහ තාක්ෂණය: පිරිසිදු කිරීමේ විභේදනය වැඩි දියුණු කිරීම සහ වැඩි ප්රෝටීන් වෙන්කර හඳුනා ගැනීම.
ස්වයංක්රීයකරණය සහ කුඩාකරණය: මෙහෙයුම් කාර්යක්ෂමතාව සහ නිරවද්යතාවය වැඩි දියුණු කිරීම.
හරිත රසායනය: රසායනික පරිභෝජනය සහ පරිසර දූෂණය අඩු කිරීම.
ඇමෝනියම් සල්ෆේට්, සාම්ප්රදායික ප්රෝටීන් වර්ෂාපතනයක් ලෙස, ප්රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේ ක්ෂේත්රයේ ප්රතිස්ථාපනය කළ නොහැකි කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. එහි පිරිවැය-ඵලදායීතාවය, පහසු ක්රියාකාරිත්වය සහ ප්රෝටීන් ක්රියාකාරකම් ආරක්ෂා කිරීම ප්රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේ ක්රියාවලීන්හි එය බහුලව භාවිතා කර ඇත. විද්යාව හා තාක්ෂණයේ දියුණුවත් සමඟ ඇමෝනියම් සල්ෆේට් පිරිපහදු කිරීමේ තාක්ෂණය නවීන තාක්ෂණය සමඟ ඒකාබද්ධ කර ප්රෝටීන් පිරිපහදු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සහ කාර්යක්ෂමතාව තවදුරටත් වැඩිදියුණු කිරීම සඳහා ප්රෝටීන් පර්යේෂණ සහ යෙදුම සඳහා ශක්තිමත් සහායක් ලබා දීමට අපේක්ෂා කෙරේ.
