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Vistas: 14 Autor: Sitio Editor Publicar Tiempo: 2024-05-16 Origen: Sitio
Las proteínas son las sustancias fundamentales de las actividades de la vida, y su diversidad en la estructura y la función determina su importancia en la biomedicina, la investigación de biología molecular y la producción industrial. La separación y la purificación de las proteínas son pasos cruciales en el campo de la biotecnología, y el sulfato de amonio, como precipitante de proteínas de uso común, juega un papel importante en el proceso de purificación de proteínas.
La purificación de proteínas es un requisito previo para garantizar la precisión de la investigación y la aplicación de proteínas. Se pueden usar proteínas purificadas para:
Análisis estructural, como cristalografía de rayos X, resonancia magnética nuclear (RMN), etc.
Investigación funcional, como la cinética enzimática, las características de unión, etc.
Desarrollo de fármacos: como objetivo o fármaco en sí mismo.
Aplicaciones industriales: como catalizadores, aditivos alimentarios, etc.
El sulfato de amonio (NH4) 2SO4) es una sal inorgánica rentable, y su aplicación en la purificación de proteínas se basa principalmente en su capacidad para inducir la precipitación de proteínas.
El sulfato de amonio aumenta la resistencia al ión de la solución, reduce la fuerza repulsiva entre las moléculas de proteínas y promueve la agregación y precipitación de las moléculas de proteínas. Este método se llama 'Precipitación de sal '.
La solubilidad de diferentes proteínas varía a diferentes concentraciones de sulfato de amonio, lo que permite la precipitación selectiva de proteínas diana al aumentar gradualmente la concentración de sulfato de amonio.
El sulfato de amonio se considera una sustancia inerte que es menos propensa a reacciones no específicas con proteínas, lo que ayuda a proteger la estructura natural y la función de las proteínas.
En primer lugar, es necesario descomponer las células y liberar proteínas intracelulares a través de métodos físicos o químicos.
Agregue sulfato de amonio a una cierta concentración para precipitar la mayor parte de la proteína y eliminar las impurezas.
Aumente gradualmente la concentración de sulfato de amonio y precipite la proteína objetivo.
Resuspender la proteína precipitada en el tampón y lavar para eliminar las impurezas residuales.
Si es necesario, la proteína también puede necesitar ser purificada aún más mediante cromatografía de intercambio de iones, cromatografía de filtración en gel o cromatografía de afinidad.
Rentabilidad: el sulfato de amonio es económico y es adecuado para aplicaciones a gran escala.
Fácil de operar: el proceso de sedimentación es simple y no requiere equipos complejos.
Actividad protectora: tiene un impacto mínimo en la estructura natural y la función de las proteínas.
Resolución limitada: es difícil distinguir proteínas con propiedades similares.
Posibles impurezas: el sulfato de amonio en sí mismo puede introducir impurezas, que deben eliminarse en los pasos posteriores.
Con la profundización de la investigación de proteínas, los requisitos para la tecnología de purificación de proteínas también están aumentando constantemente. La purificación del sulfato de amonio en el futuro se puede combinar con tecnologías más modernas, como:
Tecnología de cromatografía de alta resolución: mejora la resolución de purificación y distingue más proteínas.
Automatización y miniaturización: mejora de la eficiencia operativa y la precisión.
Química verde: reduciendo el consumo químico y la contaminación ambiental.
El sulfato de amonio, como precipitante de proteína tradicional, juega un papel irremplazable en el campo de la purificación de proteínas. Su rentabilidad, fácil operación y protección de la actividad de proteínas lo han hecho ampliamente utilizado en los procesos de purificación de proteínas. Con el desarrollo de la ciencia y la tecnología, se espera que la tecnología de purificación de sulfato de amonio se combine con la tecnología moderna para mejorar aún más la efectividad y eficiencia de la purificación de proteínas, proporcionando un apoyo más fuerte para la investigación y aplicación de proteínas.
