WIDZIA: 19 Autor: Redaktor witryny Publikuj Czas: 2024-05-16 Pochodzenie: Strona
Białka są podstawowymi substancjami działań życiowych, a ich różnorodność struktury i funkcji określa ich znaczenie w biomedycynie, badaniach biologii molekularnej i produkcji przemysłowej. Oddzielenie i oczyszczanie białek są kluczowymi etapami w dziedzinie biotechnologii, a siarczan amonu, jako powszechnie stosowany stadący białko, odgrywa ważną rolę w procesie oczyszczania białka.
Oczyszczanie białka jest warunkiem zapewnienia dokładności badań i zastosowania białka. Oczyszczone białka można zastosować do:
Analiza strukturalna, taka jak krystalografia rentgenowska, jądrowy rezonans magnetyczny (NMR) itp.
Badania funkcjonalne, takie jak kinetyka enzymów, cechy wiązania itp.
Opracowywanie leków: jako cel leku lub sam lek.
Zastosowania przemysłowe: takie jak katalizatory, dodatki żywności itp.
Siarczan amonu (NH4) 2SO4) jest opłacalną solą nieorganiczną, a jej zastosowanie w oczyszczaniu białka jest głównie oparte na jego zdolności do indukowania wytrącania białka.
Siarczan amonu zwiększa wytrzymałość jonów roztworu, zmniejsza siłę odpychającą między cząsteczkami białka i promuje agregację i wytrącanie cząsteczek białka. Ta metoda nazywa się „opadów soli ”.
Rozpuszczalność różnych białek zmienia się przy różnych stężeniach siarczanu amonu, co pozwala na selektywne wytrącanie się białek docelowych poprzez stopniowe zwiększenie stężenia siarczanu amonu.
Siarczan amonu jest uważany za substancję obojętną, która jest mniej podatna na niespecyficzne reakcje z białkami, pomagając chronić naturalną strukturę i funkcję białek.
Po pierwsze, konieczne jest rozbicie komórek i uwalnianie białek wewnątrzkomórkowych metodami fizycznymi lub chemicznymi.
Dodaj siarczan amonu do pewnego stężenia, aby wytrącić większość białka i usuń zanieczyszczenia.
Stopniowo zwiększaj stężenie siarczanu amonu i wytrąć docelowe białko.
Ponownie ponownie wytrącone białko w buforze i myj, aby usunąć resztkowe zanieczyszczenia.
W razie potrzeby białko może również wymagać dalszego oczyszczania za pomocą chromatografii wymiany jonowej, chromatografii filtracji żelowej lub chromatografii powinowactwa.
Skuteczność opłacalna: Siarczan amonu jest niedrogi i odpowiedni do zastosowań na dużą skalę.
Łatwy w obsłudze: proces sedymentacji jest prosty i nie wymaga złożonego sprzętu.
Aktywność ochronna: ma minimalny wpływ na naturalną strukturę i funkcję białek.
Ograniczona rozdzielczość: Trudno jest odróżnić białka o podobnych właściwościach.
Możliwe zanieczyszczenia: sam siarczan amonu może wprowadzić zanieczyszczenia, które należy usunąć w kolejnych etapach.
Wraz z pogłębianiem badań białek wymagania dotyczące technologii oczyszczania białek również stale rosną. Oczyszczanie siarczanu amonu w przyszłości można połączyć z bardziej nowoczesnymi technologiami, takimi jak:
Technologia chromatografii wysokiej rozdzielczości: poprawia rozdzielczość oczyszczania i rozróżnia więcej białek.
Automatyzacja i miniaturyzacja: poprawa wydajności i dokładności operacyjnej.
Zielona chemia: Zmniejszenie zużycia chemicznego i zanieczyszczenia środowiska.
Siarczan amonu, jako tradycyjny wytrąca białka, odgrywa niezastąpioną rolę w dziedzinie oczyszczania białka. Jego opłacalność, łatwe działanie i ochrona aktywności białka sprawiły, że jest szeroko stosowany w procesach oczyszczania białka. Wraz z rozwojem nauki i technologii oczekuje się, że technologia oczyszczania siarczanu amonu zostanie połączona z nowoczesną technologią w celu dalszego poprawy skuteczności i wydajności oczyszczania białek, zapewniając silniejsze wsparcie dla badań i zastosowania białka.
